Invitrogen™ Système de synthèse premier brin SuperScript™ III

Optimisé pour la synthèse d’ADNc premier brin à partir de poly(A)⁺ purifié, d’ARN total ou de RT-PCR.

Marque: Invitrogen™ 18080051

641.36 EUR valable jusqu'au 2025-06-21
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Code produit. 10308632

962.00€ / 50 réactions

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Includes: 50 μl d’Oligo(dT)₂₀ (50 μM) ; 250 μl d’hexamères aléatoires (50 ng / μl) ; 1 ml de tampon 10X RT ; 250 μl de DTT 0,1 M ; 500 μl de chlorure de magnésium 25 mM ; 250 μl de mélange dNTP 10 mM ; 50 μl de RT SuperScript III (200 U / μl) ; 100 μl d’ARNaseOUT (40 U / μl) ; 50 μl d’E. coli Rnase H (2 U / μl) ; 1,2 ml d’eau traitée au DEPC ; 20 μl d’ARN total HeLa (10 ng / μl) ; 25 μl d’amorce de contrôle sens (10 μM) ; 25 μl d’amorce de contrôle antisens (10 μM)

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Description

Ce système permet de détecter les cibles d’ARN de 100 bp à >12 kb. La quantité de produit de départ peut aller de 1 pg à 5 μg d’ARN total. La transcriptase inverse SuperScript III est une version de RT M-MLV conçue pour réduire l’activité RNase H et procurer une meilleure stabilité thermique Cette enzyme peut être utilisée pour synthétiser de l’ADNc à des températures allant de 42 à 55°C, offrant une meilleure spécificité, des rendements d’ADNc supérieurs et davantage de produit de pleine longueur que d’autres transcriptases inverses. Dans la mesure où la RT SuperScript III n’est pas inhibée sensiblement par l’ARN ribosomique et l’ARN de transfert, elle peut être utilisée pour synthétiser de l’ADNc premier brin à partir d’une préparation d’ARN total.

Utilisation du système de synthèse premier brin SuperScript III : la synthèse d’ADNc est effectuée dans un premier temps avec de l’ARN total ou de l’ARN sélectionné par poly(A)⁺ amorcé avec de l’oligo(dT), des amorces aléatoires ou une amorce génétique.
Dans un deuxième temps, la PCR est effectuée dans un tube distinct à l’aide d’amorces propres au gène d’intérêt
Pour la réaction de PCR, nous recommandons l’une des ADN polymérases suivantes :
L’ADN polymérase Platinum Taq offre des conditions de démarrage à chaud automatiques pour une meilleure spécificité jusqu’à 4 kb
L’ADN polymérase Platinum Taq haute-fidélité offre un rendement accru et une haute-fidélité pour les cibles jusqu’à 15 kb
L’ADN polymérase Platinum Pfx offre une fidélité maximale pour les cibles jusqu’à 12 kb

Température de réaction optimale : 50°C
Suffisant pour 50 réactions, sur la base d’une taille de réaction de 20 μl

PCR & PCR en temps réel, transcription inverse

Order Info

Conditions d’expédition : Glace carbonique

Spécification

Contenu et stockage	• Oligo(dT)₂₀, 50 μl (50 μM) • Hexamères aléatoires, 250 μl (50 ng/μl) • Tampon RT 10X, 1 ml • DTT, 250 μl (0,1 M) • Chlorure de magnesium, 500 μl (25 mM) • Mélange de dNTP, 250 μl (10 mM) • RT SuperScript III, 50 μl (200 U/μl) • RNaseOUT, 100 μl (40 U/μl) • RNase H d’E. coli, 50 μl (2 U/μl) • Eau traitée au DEPC, 1,2 ml • ARN total HeLa, 20 μl (10 ng/μl) • Amorce de contrôle sens, 25 μl (10 μM) • Amorce de contrôle antisens, 25 μl (10 μM) Conserver à –20°C.
GC-Rich PCR Performance	Élevé
Technique	Transcription inverse
Quantité	50 rxns
Conditions d’expédition	Glace carbonique
Type de produit final	ADNc premier brin
Format de réaction	Composants séparés
Matériau de départ	ARN

Format	Kit
Vitesse de réaction	50 min
Température de réaction optimale	50°C
Transcriptase inverse	SuperScript III
À utiliser avec (application)	Analyse par biopuces, RT-PCR
Nbre de réactions	50 réactions
Type de réactif	Transcription inverse

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